但是，如果让你具体解释一下，你好像又说不上来。

 

　　先别急，如果想要了解Nrf2-ARE通路在白癜风治疗中的作用，我们就要搞清楚这些问题：

 

　　1、Nrf2-ARE通路及其下游分子，在人黑素细胞中的表达情况如何？

 

　　2、Nrf2-ARE通路在黑素细胞抗氧化应激中的作用是什么？

 

　　3、Nrf2-ARE通路，在正常人和白癜风患者黑素细胞中的分子机制是什么？表达及功能有差异吗？

 

　　想要弄明白关于Nrf2-ARE通路的这些问题，人们可以通过实验来进行探究：

 

　　1、利用不同浓度的H_2O_2，处理人黑素细胞PIG1，MTS实验检测细胞活力，摸索建立体外黑素细胞氧化应激模型的最佳条件。

 

　　2、H_2O_2预处理后，Real-time PCR检测Nrf2下游，主要的4个抗氧化基因（HO-1,NQO-1, GCLC和GCLM）表达水平，免疫细胞化学及Real-time PCR检测，原代黑素细胞中Nrf2及HO-1的表达情况。

 

　　3、用免疫组化法，检测白癜风患者皮损处Nrf2、p-Nrf2和HO-1的表达分布模式，ELISA检测患者血清中IL-2和HO-1表达水平。

 

　　4、应用ATM干涉片段，或抑制剂KU55933抑制ATM的表达后，Real Time-PCR和免疫印迹实验，来检测Nrf2、HO-1和p-Nrf2的表达情况。H_2O_2预处理后，MTS实验、流式细胞术以及酶联免疫实验，检测氧化应激下黑素细胞活力、细胞内ROS和MDA水平，免疫组化检测白癜风患者皮损处ATM和p-ATM表达分布模式。

 

　　在上述针对Nrf2-ARE通路的一系列实验测评后，人们发现了以下结论：

 

　　1、H_2O_2可以通过浓度依赖力的方式，诱导黑素细胞死亡，1.0mM H_2O_2处理24h是体外建立黑素细胞氧化应激模型的最佳条件。

 

　　2、Real-time PCR结果表明，H_2O_2可诱导Nrf2通路下游4个主要抗氧化基因表达升高，其中HO-1变化最显著（升高了近5倍）。用HO-1抑制剂ZnPP预处理，可增加过氧化氢对细胞的损伤，而用其激动剂hemin预处理，可提高细胞抗氧化能力。

 

　　进一步研究显示，HO-1的表达水平与Nrf2的表达呈正相关，说明HO-1可通过Nrf2通路，保护黑素细胞，避免氧化损伤。

 

　　3、激光共聚焦显示，Nrf2在正常人黑素细胞（PIG1）中主要位于胞核，而在白癜风患者黑素细胞（PIG3V）中则主要位于胞浆。

 

　　进一步研究显示，在氧化应激下，白癜风患者黑素细胞中HO-1表达增高幅度，显著低于正常人黑素细胞中，说明PIG3V中Nrf2存在激活障碍，导致了HO-1表达水平的降低。

 

　　4、在PIG3V中上调Nrf2的表达，可显著减少氧化应激下细胞死亡率，说明了激活Nrf2可降低PIG3V对氧化应激的敏感力。

 

　　5、与PIG1相比，PIG3V细胞中ROS和MDA水平升高、SOD和GPx活力及总GSH和GSH含量降低，但是CAT活力在两组细胞中无显著差异，说明PIG3V细胞中氧化-抗氧化失衡。

 

　　6、白癜风患者皮损处表皮细胞中Nrf2、p-Nrf2和HO-1表达分布异常，细胞核内Nrf2、p-Nrf2和HO-1含量减少，氧化应激并未引起细胞核内Nrf2、p-Nrf2和HO-1核转位增加。

 

　　7、与健康对照相比，白癜风患者血清中HO-1水平降低，而IL-2水平升高，同时发现血清HO-1水平与IL-2水平呈显著负相关。

 

　　8、免疫组化结果表明，白癜风患者皮损处表皮细胞中ATM表达降低，而p-ATM表达升高；在PIG1中下调ATM的表达可显著抑制Nrf2、HO-1和p-Nrf2的表达，降低氧化应激下黑素细胞活力，提高细胞内ROS和MDA的水平，而对黑素合成及酪氨酸酶活力则无影响。

 

　　这提示了ATM可通过作用于Nrf2通路，来影响细胞氧化应激水平。

 

　　ATM表达量降低，可能是白癜风患者黑素细胞中Nrf2通路存在激活障碍的原因。

 

　　总之，通过以上实验，我们明确了Nrf2-ARE信号通路在黑素细胞抗氧化应激中的重要作用，发现Nrf2激活障碍，是白癜风患者黑素细胞易于发生氧化损伤的原因。

 

　　Nrf2存在激活障碍的分子机制，为进一步认识白癜风中黑素细胞的损伤机制，奠定了基础，丰富和完善了白癜风氧化应激发病机制，而且为临床上白癜风的治疗提供了新靶点。

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